Изотермическая петлевая амплификация

LAMP — метод изотермической амплификации нуклеиновых кислот наклейка

Loop-Mediated Isothermal Amplification — LAMP — изотермическая петлевая амплификация — инновационная технология, удобная для создания диагностикумов, применяемых в условиях ограниченного материального обеспечения — диагностика point of care. Использование LAMP предоставляет возможность создания высокоспецифичных тестов, направленных на выявление молекулярных мишеней различного происхождения.

Принцип работы метода LAMP?

Метод характеризуется использованием специфической полимеразы способной осуществлять реакцию замещения цепи, а также использованием 4-6 различных праймеров,
разработанных для распознавания 6 различных областей гена-мишени. Процесс протекает при постоянной температуре, амплификацию и обнаружение гена можно выполнить за один этап, инкубируя образец, праймеры, ДНК-полимеразу при постоянной температуре (около 65 °C). LAMP обеспечивает высокую эффективность амплификации: содержание ДНК увеличивается в 109-1010 раз за 15-60 минут. Высокая специфичность LAMP однозначно указывает на присутствие целевого гена в образце.

Сравнение методов LAMP и ПЦР

ПЦР	LAMP
Необходим термо-циклер	Термо-циклер не нужен
Необходимо 2 праймера	Необходимо 4-6 праймеров
Медленная амплификация: >1ч	Быстрая амплификация: <30 мин
Обычный выход ~0.2 мг	Обычный выход ~10–20 мг
Визуальная детекция невозможна	Визуальная детекция возможна
Реакция чувствительна к ингибиторам	Реакция толерантна к ингибиторам
Мультиплекс возможен	Мультиплекс проблематичен

Схема проведения анализа методом LAMP

Преимущества метода

Значительно снижает общую стоимость исследований – метод позволяет визуально оценивать результат амплификации, без использования дорогих амплификаторов.
Не требует специальных реагентов или оборудования.
Простота проведения реакции – возможность осуществлять необходимые ПЦР исследования в практически любой лаборатории.

Больше материалов и видео Вы можете найти по ссылке